ISOLASI DAN IDENTIFIKASI MOLEKULAR BAKTERI SIMBION BINTANG LAUT (Protoreaster nodosus) SEBAGAI PENGHASIL SENYAWA ANTIBAKTERI

MUH DANIAL FAJRI. Isolasi dan identifikasi molekular bakteri simbion bintang laut (Protoreaster nodosus) sebagai penghasil senyawa antibakteri (Dibimbing oleh Sartini dan Subehan).

Salah satu pencarian senyawa antibakteri yang saat ini banyak dikembangkan adalah dengan memanfaatkan bakteri simbion dari bahan alam termasuk biota laut. Tahap awal penelitian ini dilakukan isolasi bakteri simbion dari bintang laut (Protoreaster nodosus) dengan metode agar cawan. Isolat murni selanjutnya diproses melalui fermentasi dengan metode submerged fermentation menggunakan media Nutrient broth yang ditambahkan dengan ekstrak yeast dan digojok menggunakan shaker selama 7 hari pada kecepatan 200 rpm untuk memproduksi senyawa metabolit sekunder yang akan diuji aktivitas dengan metode difusi agar dan KLT-biautografi untuk melihat kemampuan antibakterinya dan dilakukan skrining fitokimia untuk melihat golongan senyawanya.

Hasil Penelitian diperoleh 4 isolat bakteri, dengan kode BS 1T, BS 2T, BS 3T dan BS 4T menunjukkan aktivitas antibakteri terhadap bakteri uji Staphylococcus aureus ATCC 25923, Bacillus subtilis ATCC 6633, Salmonella thypi NCTC 786 dan Escherichia coli ATCC 25923, dengan golongan senyawa hasil identifikasi skrining fitokimia menunjukkan steroid. Selanjutnya 4 isolat yang potensial dilakukan identifikasi secara molekuler menggunakan sampel DNA dari isolat bakteri simbion bintang laut. Sampel DNA tersebut diamplifikasi menggunakan metode PCR dan selanjutnya dielektroforesis dan disekuensing. Sekuens DNA isolat bakteri simbion bintang laut selanjutnya diproses menggunakan program BLAST (NCBI) dan dianalisis menggunakan program MEGA 7 dengan metode Maximum Likelihood. Berdasarkan karakteristik molekuler diperoleh hasil bahwa Isolat bakteri simbion bintang laut dengan kode BS 1T identik Bacillus Sp, isolat kode BS 2T identik Bacillus amyloliquefaciens, dan 2 isolat kode BS 3T dan BS 4T belum teridentifikasi dan termasuk kelompok gram negatif.