LIGASI Rv1419 Mycobacterium tuberculosis KE VEKTOR EKSPRESI pTrcHis A DAN TRANSFORMASI KE Escherichia coli BL21=LIGATION OF Rv1419 OF Mycobacterium tuberculosis INTO pTrcHis A EXPRESSION VECTOR AND TRANSFORMATION INTO Escherichia coli BL21

Latar Belakang. Tuberkulosis (TB) merupakan penyakit yang disebabkan oleh bakteri Mycobacterium tuberculosis. Salah satu usaha preventif untuk mencegah tuberkulosis yaitu pemberian vaksinasi BCG. Namun, efektivitas vaksin BCG mengalami penurunan seiring dengan berkembangnya strain baru dari agen Mycobacterium tuberculosis. Salah satu kandidat vaksin baru yang diharapkan dapat memberikan respon imun yang lebih efektif yaitu menggunakan protein rekombinan sMTL-13 yang disekresikan oleh Rv1419 Mycobacterium tuberculosis. Protein sMTL-13 menyebabkan peningkatan produksi IFN-γ oleh PBMC dari penderita tuberkulosis yang menunjukkan bahwa sMTL-13 memiliki aktivitas imunogenik. Tujuan. Penelitian ini bertujuan untuk ligasi Rv1419 ke vektor ekspresi pTrcHis A dan Transformasi ke Escherichia coli BL21 serta memperoleh klon rekombinan pTrcHis A – 1419. Metode. Metode yang digunakan pada penelitian adalah amplifikasi Rv1419 dengan metode Polymerase Chain Reaction (PCR), Purifikasi Rv1419, restriksi Rv1419 dan vektor pTrcHis A menggunakan fastdigest enzim KpnI dan HindIII, ligasi Rv1419 ke pTrcHis A dengan enzim T4 DNA ligase, transformasi ke Escherichia coli BL21, seleksi transforman dan karakterisasi klon rekombinan dengan PCR Koloni dan analisis restriksi. Hasil. PCR Koloni memperlihatkan pita DNA sesuai gen target berukuran 474 pasang basa. Analisis restiksi plasmid pTrcHis A – 1419 memperlihatkan fragmen vektor 4395 pasang basa dan DNA sisipan 474 pasang basa. Kesimpulan. Ligasi Rv1419 ke vektor ekspresi pTrcHis A telah berhasil dilakukan dan diperoleh plasmid rekombinan pTrcHis A – 1419 berukuran 4869 pasang basa.