PRODUKSI PROTEIN FUSI REKOMBINAN CFP-10 DAN sMTL-13 Mycobacterium tuberculosis PADA Escherichia coli BL21=PRODUCTION OF RECOMBINANT FUSION PROTEINS CFP-10 AND sMTL-13 OF Mycobacterium tuberculosis IN Escherichia coli BL21

Latar Belakang. Tuberkulosis (TB) tetap menjadi salah satu dari sepuluh penyakit menular paling mematikan di dunia, dengan insidensi mencapai 8,2 juta jiwa secara global. Vaksin Bacillus Calmette-Guerin (BCG) merupakan satu-satunya vaksin yang disetujui dalam program imunisasi dasar internasional, namun evektivitasnya terbaas dalam menekan angka mortalitas pada anak dan tidak efektif bagi orang dewasa dengan TB aktif. Tujuan. Penelitian ini bertujuan untuk memproduksi dan melakukan karakterisasi protein fusi protein fusi rekombinan CFP-10 dan sMTL-13 Mycobacterium tuberculosis pada Escherichia coli BL21. Metode. Penelitian ini diawali dengan kultur sel Escherichia coli BL21 yang membawa plasmid rekombinan gen Rv3874 dan Rv1419. Induksi dilakukan menggunakan Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside (IPTG). Sel hasil induksi kemudian dilisis menggunakan Radio-Immunoprecipitation Assay (RIPA) Lysis Buffer untuk mengekstraksi protein intraselular. Karakterisasi protein dilakukan dengan metode Sodium Dodecyl Sulfate-Polyacrylamide Gel Electrophoresis (SDS-PAGE), diikuti dengan proses staining dan dekolorisasi untuk visualisasi pita protein. Hasil. Analisis SDS-PAGE menunjukkan terbentuknya pita protein spesifik dengan berat molekul sekitar 28,5 kDa. Ukuran tersebut sesuai dengan prediksi berat molekul protein fusi target yang tersusun atas 259 asam amino. Kesimpulan. Protein fusi rekombinan CFP-10 dan sMTL-13 dari Mycobacterium tuberculosis pada Escherichia coli telah berhasil diproduksi dan dikarakterisasi dengan hasil berat molekul sesuai, yaitu 28,5 kDa.