LIGASI Rv3874 Mycobacterium tuberculosis ke VEKTOR EKSPRESI pTrcHisA dan TRANSFORMASI ke Escherichia coli BL2=LIGATION of Rv3874 Mycobacterium tuberculosis into the pTrcHisA EXPRESSION VECTOR and TRANSFORMATION into Escherichia coli BL21

Latar belakang. Tuberkulosis (TBC) masih menjadi masalah kesehatan global, termasuk di Indonesia sebagai salah satu negara dengan beban tertinggi. Pencegahan saat ini mengandalkan vaksin Bacillus Calmette–Guérin (BCG) yang digunakan sejak 1921, namun efektivitasnya terbatas. Oleh karena itu, diperlukan pengembangan vaksin alternatif, seperti vaksin berbasis DNA yang memanfaatkan protein rekombinan CFP-10 yang dikode oleh gen Rv3874 dari Mycobacterium tuberculosis. Protein CFP-10 mampu memicu respons imun kuat pada tahap awal infeksi sehingga berpotensi sebagai kandidat antigen untuk pengembangan vaksin dan diagnosis imunologis TBC. Tujuan. Melakukan kloning gen Rv3874 ke dalam plasmid ekspresi pTrcHisA dan karakterisasi plasmid rekombinan. Metode. Penelitian ini diawali dengan purifikasi dan amplifikasi gen Rv3874, kemudian gen dan plasmid pTrcHisA di restriksi lalu gen diligasikan ke dalam plasmid. Setelah itu, hasil ligasi Rv3874-pTrcHis A di transformasikan ke dalam E.Coli BL21. Hasil transforman di dikarakterisasi dengan metode PCR koloni dan isolasi serta restriksi plasmid hasil rekombinan. Hasil. Penelitian ini memperoleh hasil hasil ligasi gen Rv3874-pTrcHisA dengan ukuran total 4701 pb dan gen Rv3974 303 pb. Kesimpulan. Ligasi gen Rv3874 ke dalam plasmid pTrcHis A dan transformasi ke E.coli BL21 telah berhasil dilakukan, dapat dilihat dari hasil karakterisasi PCR koloni dan isolasi serta restriksi plasmid rekombinan.