EKSPLORASI BAKTERI LAUT PENGHASIL PROTEASE SEBAGAI KANDIDAT ANTIBAKTERI TERHADAP METHICILLIN-RESISTANT Staphylococcus aureus (MRSA) SECARA IN SILICO, IN VITRO, DAN IN VIVO=EXPLORATION OF PROTEASE-PRODUCING MARINE BACTERIA AS AN ANTIBACTERIAL CANDIDATE AGAINST METHICILLIN-RESISTANT Staphylococcus aureus (MRSA) IN SILICO, IN VITRO, AND IN VIVO

Methicillin-Resistant Staphylococcus aureus (MRSA) merupakan ancaman kesehatan global yang resisten terhadap hampir semua antibiotik β-laktam akibat produksi protein pengikat penisilin 2a (PBP2a) yang mendorong urgensi pengembangan agen antimikroba alternatif WHO memproyeksikan resistensi antimikroba dapat menyebabkan 10 juta kematian per tahun pada 2050. Bakteri laut yang hidup di kondisi ekstrem menghasilkan protease dengan karakteristik unik dan potensi bioaktivitas tinggi sebagai kandidat agen terapeutik anti-MRSA. Tujuan: mengisolasi, mengidentifikasi, memproduksi, memurnikan, dan mengevaluasi aktivitas protease bakteri laut dari Pantai Losari Makassar sebagai kandidat antimikroba terhadap MRSA melalui pendekatan in silico, in vitro, dan in vivo. Metode: isolasi bakteri dilakukan dari sampel air laut dan sedimen dengan skrining aktivitas proteolitik. Isolat terpilih diidentifikasi melalui sekuensing gen 16S rRNA. Pemurnian dilakukan melalui fraksinasi amonium sulfat, dialisis, dan kromatografi gel filtrasi Sephadex G-75. Identifikasi senyawa bioaktif menggunakan LC-MS/MS dilanjutkan analisis molekular docking terhadap protein target MRSA. Aktivitas biologis dievaluasi melalui uji antioksidan (DPPH) dan antimikroba in vitro (metode difusi cakram Kirby-Bauer). Uji in vivo menggunakan mencit Swiss Webster dengan luka insisi terinfeksi MRSA. Hasil: penelitian berhasil mengisolasi 25 isolat murni dengan dua isolat tertinggi adalah Shewanella algae (zona hambat 14,1 ± 0,9 mm) dan Vibrio alginolyticus (zona hambat 13,2 ± 0,8 mm). Protease S. algae merupakan neutral protease mesofilik (pH optimum 7, suhu 37°C) dengan berat molekul 75 kDa. LC-MS/MS mengidentifikasi Netropsin yang menunjukkan afinitas pengikatan tinggi terhadap protein target MRSA. Fraksi 12 memiliki aktivitas antioksidan tertinggi (IC₅₀ 56,59 μg/mL) dan efisiensi molekuler sangat tinggi. Gel protease 0,1% menunjukkan efektivitas tertinggi dengan waktu penyembuhan 10,67 hari, lebih superior dibandingkan mupirocin 2% (11 hari). Kesimpulan: protease Shewanella algae berpotensi sebagai alternatif terapi inovatif untuk infeksi MRSA dengan bioaktivitas ganda dan efektivitas superior pada konsentrasi optimal rendah