DETEKSI GEN Ara- DAN GEN penA DARI BAKTERI Burkholderia pseudomallei PENYEBAB PENYAKIT MELIOIDOSIS DARI ISOLAT KLINIS PADA PASIEN DI KOTA MAKASSAR = DETECTION OF THE ARA⁻ GENE AND PENA GENE OF Burkholderia pseudomallei, THE CAUSATIVE AGENT OF MELIOIDOSIS, FROM CLINICAL ISOLATES IN PATIENTS FROM MAKASSAR CITY

Burkholderia pseudomallei merupakan bakteri penyebab melioidosis dan sebagian besar terinfeksi dari lingkungan melalui ingesti, inhalasi, dan inokulasi. Meliodosis walaupun endemik di beberapa negara di Asia dan Australia, tetapi kasus di Indonesia masih jarang dilaporkan termasuk di Makassar yang temuan terakhir isolat Burkholderia pseudomallei dilaporkan pada tahun 2021. Diagnosis melioidosis sulit dilakukan hanya berdasarkan gejala klinis saja, dengan mendapatkan hasil kultur Burkholderia. pseudomallei yang positif, sehingga untuk menegakkan diagnosisnya memerlukan fasilitas yang relatif canggih. Penelitian ini bertujuan untuk mendeteksi B. pseudomallei dalam sampel klinis dari pasien yang diduga menderita melioidosis. Sebanyak 21 sampel yang dikumpulkan dimasukkan dalam penelitian ini. Identifikasi isolat bakteri didasarkan pada morfologi koloni, pemeriksaan mikroskopis, uji biokimia, uji sensitifitas, dan uji PCR, dan identifikasi menggunakan gen16SrRNA. Hasil yang diperoleh dari 21 isolat sampel klinis, sebanyak 16 isolat yang disuspek Burkholderia sp setelah diisolasi menggunakan media selektif Ashdown agar dan uji biokimia, dan 3 isolat yang terkonfirmasi Burkholderia pseudomallei pada hasil deteksi menggunakan primer spesifik sebagian besar terdeteksi positif gen Ara-, yang mengindikasikan sifat virulen bakteri, sedangkan gen penA tidak terdeteksi pada 21 isolat yang menunjukkan hasil uji sensitivitas antibiotik terhadap antibiotik ceftazidime. semua isolat menunjukkan sensitivitas yang nyata dan berdasarkan sensitivitas oleh Oxoid yaitu sensitif >18 mm. Temuan ini menegaskan pentingnya pemeriksaan molekuler untuk mendukung diagnosis melioidosis serta pemilihan terapi antibiotik yang tepat. Dan telah ditemukan bakteri Burkholderia pseudomallei dari RS Labuang Baji di Kota Makassar, Provinsi Sulawesi Selatan, dari pasien yang mempunyai gejala klinis seperti tuberkulosis sehingga disarankan dapat menjadi acuan untuk penelitian lanjutan tentang penyakit melioidosis. Burkholderia pseudomallei is the causative agent of melioidosis, with most infections acquired through environmental exposure via ingestion, inhalation, or inoculation. Although melioidosis is endemic in several Asian and Australian countries, reported cases in Indonesia remain rare, including in Makassar, where the most recent isolation of B. pseudomallei was reported in 2021. Diagnosis based solely on clinical symptoms is challenging, as confirmation requires positive B. pseudomallei culture, which in turn demands advanced laboratory facilities. This study aimed to detect B. pseudomallei in clinical samples from patients suspected of melioidosis. A total of 21 samples were analyzed. Identification was based on colony morphology, microscopic examination, biochemical tests, antibiotic susceptibility testing, PCR amplification, and 16S rRNA gene analysis. Of the 21 isolates, 16 were suspected as Burkholderia species after selective isolation on Ashdown agar and biochemical tests, while 3 isolates were confirmed as B. pseudomallei using species-specific primers. Most confirmed isolates were positive for the Ara- gene, indicating virulence, whereas the penA gene was not detected in any isolates. Antibiotic susceptibility testing showed that all isolates were sensitive to ceftazidime, with inhibition zone diameters greater than 18 mm according to Oxoid standards. These findings highlight the importance of molecular diagnostics for accurate melioidosis detection and appropriate antibiotic selection. Furthermore, this study confirms the presence of B. pseudomallei in Makassar, emphasizing the need for further research on melioidosis in Indonesia.

Keyword : Burkholderia pseudomallei, Melioidosis, Gen Ara-, Gen penA, PCR.