FUSI GEN Rv3875 DAN Rv1926c DARI Mycobacterium tuberculosis SEBAGAI KANDIDAT VAKSIN SUBUNIT TUBERKULOSIS = FUSION OF Rv3875 AND Rv1926c GENES FROM Mycobacterium tuberculosis AS A CANDIDATE FOR TUBERCULOSIS SUBUNIT VACCINE

Latar belakang. Tuberkulosis (TB) merupakan penyakit yang disebabkan oleh bakteri Mycobacterium tuberculosis. Secara global jumlah kasus Tb yang dilaporkan yakni sebanyak 10,8 juta kasus. Vaksin Bacille Calmette-Guerin (BCG) adalah satusatunya vaksin yang disetujui untuk pencegahan TB. Namun, vaksinasi BCG memiliki efektivitas pertahanan dari 0% hingga 80% pada orang dewasa. Dilakukan penelitian pengembangan kandidat vaksin subunit menggunakan fusi gen Rv3875 dan Rv1926c untuk menghasilkan kandidat vaksin yang lebih unggul dari vaksin BCG. Tujuan. Melakukan fusi gen Rv3875 kedalam plasmid rekombinan Rv1926cpCold II dan melakukan karakterisasi klon rekombinan Rv3875-Rv1926c-pCold II. Metode. Penelitian diawali dengan amplifikasi gen Rv3875 menggunakan teknik PCR, dan dipurifikasi, kemudian bersama plasmid rv1926c‑pCold II didigesti dengan enzim restriksi BamHI dan HindIII lalu diligasi. Konstruk rekombinan ditransformasi ke sel kompeten E. coli BL21. Klon positif diverifikasi dengan PCR koloni, isolasi plasmid, dan sekuensing. Hasil. Hasil ligasi plasmid rekombinan Rv3875-Rv1926cpColdII berukuran 5139 bp. Terlihat bahwa gen Rv3875 berhasil disisipkan ke dalam plasmid rekombinan Rv1926c-pCold II. Analisis sekuensing juga memperlihatkan bahwa ujung 3’ dari gen Rv3875 telah berhasil terfusi dengan ujung 5’ dari gen Rv1926c melalui penggabungan yang difasilitasi oleh situs restriksi HindIII. Kesimpulan. Fusi gen Rv3875 ke dalam plasmid Rv1926c-pCold II telah berhasil dilakukan dan diperoleh plasmid rekombinan Rv3875-Rv1926c-pCold II dengan ukuran 5139 bp. Hasil karakterisasi klon rekombinan dengan PCR koloni dan analisis sekuensing menujukkan bahwa gen Rv3875 berhasil teramplifikasi dan terintegrasi secara tepat.

Keyword : Fusi gen, Rv3875, Rv1926c, sekuensing.