ISOLASI SENYAWA BIOAKTIF BAKTERI SIMBION TERPILIH DARI ASCIDIANS JENIS Polycarpa aurata (QUOY & GAIMARD, 1834) SEBAGAI ANTIBAKTERI DAN ANTIBIOFILM = ISOLATION OF BIOACTIVE COMPOUNDS OF SELECTED SYMBIONT BACTERIA FROM ASCIDIANS TYPE Polycarpa aurata (QUOY & GAIMARD, 1834) AS ANTIBACTERIAL AND ANTIBIOFILM

Latar Belakang. Bakteri simbion merupakan bakteri yang hidup dan berinteraksi pada inang yang sifatnya simbiosis mutualisme, dengan metabolit sekunder yang dihasilkan dapat bermanfaat sebagai antibakteri, antijamur, antikanker, antiinflamasi. Tujuan. Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi dan mengidentifikasi senyawa bioaktif dari isolat bakteri simbion Polycarpa aurata serta megevaluasi aktivitasnya sebagai antibakteri dan antibiofilm. Metode. Isolasi bakteri simbion Polycarpa aurata berdasarkan analisis makroskopik dan mikroskopik, optimasi pertumbuhan secara fermentasi menggunakan variasi nutrisi sumber nitrogen (ekstrak beef, pepton, tripton dan ekstrak yeast), analisis molekuler secara Polymerase Chain Reaction (PCR), analisis struktur secara spektroskopi, aktivitas antibakteri secara difusi agar dan KLT-Bioautografi, aktivitas antibiofilm secara elisa. Hasil. Hasil isolasi bakteri simbion dari Polycarpa aurata diperoleh 24 isolat bakteri simbion dengan hasil pemurnian isolat diperoleh 17 isolat murni yang terdiri dari 5 isolat Polycarpa aurata berwarna kuning, 4 isolat Polycarpa aurata berwarna putih dan 8 isolat Policarpa aurata berwarna biru. Hasil karakteriasi berdasarkan parameter makroskopi dan mikroskopik diperoleh morfologi yang berbeda-beda dan aktivitas antobakteri dari isolat bakteri simbion diperoleh 6 isolat dengan aktivitas terbanyak menghambat bakteri patogen yaitu isolat AQ3-1, AQ3-2, AQ3-3, AQ3-5, AL3-5 dan AQ2-1. Hasil analisis molekuler isolat bakteri simbion diperoleh ke 6 isolat bakteri simbion tersebut diperoleh strain bakteri Bacillus licheniformis (kode isolat AQ3-1, AQ3-2, AQ3-3), strain bakteri Paenibacillus alvei (kode isolat AQ3-5), strain bakteri Pseudomonas aeruginosa (kode isolat AL3-5 dan AQ2-1). Hasil produksi metabolit sekunder dari ke 6 isolat bakteri simbion Polycarpa aurata secara fermentasi diperoleh waktu optimal masing-masing isolat bakteri simbion yaitu isolat AQ3-1 dan AL3-5 pada jam ke 30, isolat AQ3-2 pada jam ke 22, isolat AQ3-3 pada jam ke 34, isolat AQ3-5 pada jam ke 32, dan isolat AQ2-1 pada jam ke 68. Analisis aktivitas antibakteri berdasarkan variasi waktu diperoleh diameter zona hambat terbesar pada isolat AQ2-1 sebesar 37,27±0,01 mm terhadap bakteri Bacillus subtilis ATCC 6633 dan Shigella dysenteriae ATTC 13313, dengan berat ekstrak etil asetat isolat bakteri simbion Polycarpa aurata secara fermentasi pada isolat AQ3-1 = 57,2 mg, isolat AQ3-2 = 19,7 mg dan isolat AQ2-1 = 16 mg menggunakan nutrisi nutrisi ekstrak yeast, isolat AQ3-3 = 12,8 mg dan isolat AL3-5 = 29,2 mg menggunakan nutrisi ekstrak beef, serta isolat AQ3-5 = 40, 9 mg menggunakan nutrisi tripton. Isolat aktif diekstraksi hingga diperoleh ekstrak etil asetat dan etanol isolat AQ2-1. Hasil isolasi senyawa bioaktif dari ekstrak etil asetat isolat AQ2-1 diperoleh 2 isolat murni dan dianalisis struktur senyawa secara spektroskopi UV-Vis, NMR (1H-NMR dan 13C-NMR), COSY, HMBC, HSQC, dan MS diperoleh senyawa Adenin riboside (isolat 1) dan Bis(2-ethylhexyl) benzene-1,2-dicarboxylate (isolat 2). Hasil pengujian aktivitas antibakteri secara difusi agar diperoleh diameter zona hambat terbesar pada isolat 1 terhadap bakteri Escherichia coli ATTC 25922 sebesar 12,21 mm, isolat 2 terhadap bakteri Salmonella thypi NCTC 786 sebesar 10,91 mm dan secara KLT-Bioautografi dari isolat 1 dan 2 aktif terhadap bakteri Escherichia coli ATTC 25922, Salmonella typhi NCTC 786, Shigella dysenteriae, dan Vibrio cholerae ATCC 25175, serta uji aktivitas antibiofilm menggunakan pembaca Elisa menunjukkan bahwa isolat 1 diperoleh % penghambatan biofilm terbaik terhadap bakteri Staphylococcus aureus ATCC 25923 sebesar 77,09 % dan isolat 2 terhadap bakteri Streptococcus mutans ATCC 25175 sebesar 73,61 %. Kesimpulan. Senyawa Adenin riboside dan Bis(2-ethylhexyl) benzene-1,2-dicarboxylate dari ekstrak etil asetat fermentat isolat AQ2-1 bakteri simbion Polycarpa aurata memberikan aktivitas terhadap bakteri patogen Gram-negatif dan Gram-positif.

Keyword : Polycarpa aurata, Bakteri Simbion, Analisis Molekuler, Senyawa Bioaktif, Antibakteri dan Antibiofilm