Pengembangan dan Validasi Metode Analisis Obat Carvedilol dalam Plasma Tikus Menggunakan Metode HPLC-UV = Development and Validation of Carvedilol in Rat Plasma Using HPLC-UV Method

Latar Belakang. Carvedilol termasuk obat BCS kelas II dengan bioavailabilitas yang rendah yaitu sebesar 25%-35%. Obat dengan bioavailabilitas rendah memerlukan pengembangan sediaan lebih lanjut yang membutuhkan pengujian profil farmakokinetik yang diuji secara pra-klinis pada hewan coba menggunakan metode analisis yang tepat. Oleh karena itu, dibutuhkan sebuah metode yang sederhana untuk mengukur kadar carvedilol dalam plasma darah tikus. Tujuan. Penelitian ini bertujuan untuk mendapatkan kondisi HPLC yang optimum dan validasi berdasarkan parameter yang telah ditetapkan menurut pedoman ICH M10. Metode. Penelitian ini terbagi menjadi beberapa tahap, diantaranya optimasi kondisi kromatografi, preparasi larutan kurva kalibrasi dan QCs menggunakan metode SPE, dan validasi metode analisis. Hasil. Metode HPLC-UV berhasil dikembangkan dengan menggunakan fase gerak asetonitril:TEA 1% pH 3,5 (40:60 v/v), kolom Shim-pack GIST C18-AQ (I.D. 4,6 x 250 mm; 5 սm), laju alir 1,5 mL/menit, volume injeksi 40 µL yang diukur pada panjang gelombang 214 nm untuk IS (Propranolol HCl) dan 242 nm untuk carvedilol. Kondisi kromatografi ini berhasil menganalisis carvedilol dengan waktu retensi yang singkat yaitu 5,233 menit dan IS yaitu 2,856 menit dan memenuhi kriteria parameter optimasi. Metode analisis yang dikembangkan ini memenuhi persyaratan parameter validasi yaitu kurva kalibrasi yang linear pada rentang konsentrasi 0,25-8 ppm mengikuti persamaan regresi y=91349x-846,42 (R2=0,9996) dengan LOD dan LOQ untuk carvedilol masing-masing diperoleh sebesar 0,075 ppm dan 0,229 ppm, serta akurasi (80,730-108,296%) dan presisi (<10%). Parameter lainnya yaitu selektivitas, carry-over, efek matriks, stabilitas, dan reinjection reproducibility juga memenuhi persyaratan sesuai pedoman. Kesimpulan. Penelitian ini berhasil memperoleh metode kromatografi yang optimum dengan pengukuran pada dua panjang gelombang yang berbeda dan berhasil menganalisis carvedilol dalam plasma tikus dengan waktu retensi yang singkat dan telah valid menurut pedoman ICH M10.

Kata kunci: kromatografi cair kinerja tinggi-ultraviolet (KCKT-UV); karvedilol; plasma tikus; ekstraksi fase padat; validasi