Isolasi Protein dan Hidrolisat Peptida Bioaktif dari Bakteri Simbion Teripang Hitam Holothuria atra sebagai Agen Antikanker dan Antioksidan = Isolation of Protein and Peptide Hydrolysate Bioactive from Symbiotic Bacteria Black Sea Cucumber Holothuria atra as Anticancer and Antioxidant Agent

ABSTRAK Bakteri simbion teripang hitam sering digunakan bahan baku obat, karena memiliki berbagai kandungan senyawa bioaktif. Tujuan penelitian ini adalah mengisolasi dan mengidentifikasi bakteri simbion penghasil protein bioaktif dari teripang hitam asal Pulau Samalona, Kecamatan Mariso, Kelurahan Mariso, Kota Makassar, Sulawesi Selatan. Selain itu, protein bioaktif yang telah diisolasi diidentifikasi aktivitas biologisnya yaitu antioksidan dan toksisitas. Holothuria atra yang teridentifikasi sebagai Enterobacter sp. menggunakan metode PCR dan sekuensing gen berbasis 16S rRNA (63F dan 1387R) serta uji biokimia. Protein ekstraseluler dan intraseluler diisolasi menggunakan metode fraksinasi amonium sulfat pada tingkat kejenuhan (F1) 0–20%, (F2) 20–40%, (F3) 40–60% dan (F4) 60–80%. Prapemurnian protein dilakukan dengan cara dialisis menggunakan kantong selofan dengan total protein ekstraseluler F1 3,124 mg; F2 10,692 mg; F3 20,979 mg; F4 28,609 mg dan protein intraseluler F1 33,291mg; F2 9,086 mg; F3 21,894 mg; F4 32,914 mg. Uji antioksidan dilakukan dengan metode DPPH yang menunjukkan bahwa fraksi protein F2 Ekstraseluler diperoleh nilai IC50 sebesar 78,42 ppm. Uji toksisitas dengan BSLT didapatkan pada fraksi protein F4 ekstraseluler memiliki toksisitas tertinggi dengan nilai LC50 54,21 ppm.

Keywords : Antikanker, Antioksidan, Enterobacter sp, Protein Bioaktif, Teripang Hitam.