VALIDASI METODE ANALISIS SENYAWA TIOPIPERIN DALAM PLASMA TIKUS MENGGUNAKAN HPLC = ANALYTICAL METHOD VALIDATION OF THIOPIPERINE IN RAT PLASMA USING HPLC

Tiopiperin merupakan senyawa derivat piperin yang mengalami modifikasi struktur dan memiliki potensi sebagai kandidat obat karena memiliki aktivitas sebagai antikanker dan antiinflamasi. Sebelum dilakukan uji farmakokinetik, dibutuhkan suatu metode analisis yang tervalidasi untuk menganalisis senyawa tiopiperin dalam plasma darah menggunakan HPLC. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui kondisi optimal, metode ekstraksi serta parameter validasi dari senyawa tiopiperin dalam plasma darah. Adapun pengujian yang dilakukan meliputi Penetapan Metode Ekstraksi, Uji Linearitas, Batas Deteksi (LOD), Batas Kuantifikasi (LOQ), Selektifitas, Akurasi dan Presisi. Pengukuran dilakukan dengan menggunakan kolom Xselect CSHTM C18 (Waters,3.0 x 150 mm, 3.5 µm) dengan fase gerak Asetonitril : Air (60:40 v/v) dengan laju alir 0,5 mL/menit, Detektor PDA pada panjang gelombang 340 nm dan volume penyuntikan 20 µL. Hasil yang diperoleh pada penetapan metode ekstraksi yaitu pelarut yang memiliki hasil optimum adalah metanol dengan perbandingan volume plasma (1:3). Pada uji linearitas didapatkan persamaan kurva kalibrasi y= 128924x + 4413,5 dengan nilai (r2)= 0,9991 dan Vxo = 2,28% yang telah memenuhi syarat ≤2%. Nilai LOD dan LOQ masing – masing 0,261 dan 0,791 µg/ml. Peak sampel pada plasma dan sampel dibandingkan dengan peak blanko memiliki selektifitas yang baik. Nilai %RE dari konsentrasi rendah, sedang dan tinggi pada intraday dan interday masing masing sebesar 9,64; 7,06; 7,74 dan 6,20; 7,34; 9,07. Pada semua pengujian didapatkan nilai %RE yang memenuhi persyaratan yaitu ±15%. Dapat disimpulkan bahwa metode yang telah dikembangkan di atas telah valid berdasarkan petunjuk validasi metode analisis resmi berdasarkan parameter kesesuaian sistem, linearitas, presisi, dan akurasi.
Kata Kunci : HPLC, Plasma Tikus, Tiopiperin, Validasi